La variante monofásica de Salmonella Typhimurium (1,4,[5],12:i:-) se ha convertido en un serovar de especial interés sanitario por ser causante de un porcentaje relativamente alto de salmonelosis humanas. Para garantizar una identificación fiable y armonizada, la norma UNE-EN ISO 6579-4:2025 establece un método basado en PCR que permite identificar esta variante, para la que se han establecido criterios microbiológicos legales.

Identificación molecular de Salmonella Typhimurium monofásica

La UNE-EN ISO 6579-4:2025 se enmarca dentro de los métodos normalizados de referencia para el análisis microbiológico de la cadena alimentaria y responde a una necesidad concreta del control oficial y del autocontrol: la identificación fiable de la variante monofásica de Salmonella Typhimurium (1,4,[5],12:i:-).

Esta variante ha adquirido una relevancia epidemiológica creciente en las últimas décadas, tanto en productos alimentarios como en producción animal y en brotes de salmonelosis humana. Su similitud antigénica con otras Salmonella y con la forma bifásica de S. Typhimurium dificulta la diferenciación mediante métodos serológicos tradicionales, lo que justifica el desarrollo de un método molecular específico, estandarizado y reproducible.

La norma está destinada principalmente a:

• laboratorios de control alimentario, públicos y privados,
• laboratorios acreditados según ISO/IEC 17025,
• control oficial, programas de vigilancia y estudios epidemiológicos,
• a cualquier laboratorio que necesite confirmar la identidad de aislados de Salmonella con implicaciones sanitarias o regulatorias.

UNE-EN ISO 6579 en el análisis de Salmonella 

La UNE-EN ISO 6579 es una norma horizontal, es decir, aplicable a una amplia gama de matrices y sectores de la cadena alimentaria. Está estructurada en varias partes, cada una con un objetivo específico:

• UNE-EN ISO 6579-1: detección de Salmonella mediante métodos culturales clásicos.
• UNE-EN ISO 6579-2: métodos para el recuento de Salmonella.
• UNE-EN ISO 6579-3: directrices y procedimientos para el serotipado.
• UNE-EN ISO 6579-4: identificación específica de Salmonella Typhimurium monofásica mediante PCR.

La Parte 4 no sustituye a las anteriores, sino que las complementa. Una vez que el género Salmonella ya ha sido aislado e identificado, la Parte 4 permite una caracterización molecular avanzada, clave en el contexto actual de vigilancia y trazabilidad.

Objeto y campo de aplicación

El objeto de la UNE-EN ISO 6579-4:2025 es especificar un método basado en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) par:

• la diferenciación de los aislados que se están analizando entre Salmonella Typhimurium monofásica y la variante monofásica de otro serovar de Salmonella no-Typhimurium que poseen la misma fórmula antigénica
• la identificación de si el aislado que se está analizando es Salmonella Typhimurium monofásica o Salmonella Typhimurium (bifásica).

El método se aplica a aislados bacterianos obtenidos en cultivo puro, procedentes de:

• productos destinados al consumo humano
• productos destinados a la alimentación animal
• muestras ambientales recogidas del área de producción y manipulación de los alimentos destinados al consumo humano y animal 
• muestras procedentes de la etapa de producción primaria

El método se basa en una PCR específica de secuencias génicas, diseñada para detectar patrones genéticos característicos de Salmonella Typhimurium monofásica. Es importante destacar que la norma no describe un método de detección directa en matriz, sino un procedimiento de confirmación e identificación molecular a partir de un aislamiento previo.

Referencia:

Más información sobre la norma UNE-EN ISO 6579-4 Microbiología de la cadena alimentaria Método horizontal para la detección, recuento y serotipado de Salmonella Parte 4: Identificación de Salmonella Typhimurium monofásica (1,4,[5],12:i:-) mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) (ISO 6579-4:2025) en la web de UNE