AENOR ha publicado la norma UNE-EN ISO 11290-1:2018 para la detección y el recuento de Listeria monocytogenes y de Listeria spp. (Parte 1: Método de detección), que anula y sustituye a la versión de 1997. La norma es aplicable para productos destinados al consumo humano y alimentación de animales, asi como para muestras ambientales recogidas del área de producción y de manipulación de alimentos.

Método horizontal para la detección y el recuento de Listeria

Ya está disponible en la web de AENOR la nueva versión de la norma UNE-EN ISO 11290-1:2018 Microbiología de la cadena alimentaria. Método horizontal para la detección y el recuento de Listeria monocytogenes y de Listeria spp. Parte 1: Método de detección. (ISO 11290-1:2017).

Esta norma anula y sustituye a las Normas UNE-EN ISO 11290-1:1997 y su rectificación, UNE-EN ISO 11290-1:1997/A1:2005, que han sido revisadas técnicamente.

Objeto y campo de aplicación

Este documento describe un método horizontal para:
– la detección de L. monocytogenes; y
– la detección de Listeria spp. (incluida L. monocytogenes).
El documento resulta aplicable para:
– productos destinados al consumo humano y a la alimentación de los animales
– muestras ambientales recogidas del área de producción de alimentos y de manipulación de alimentos.

Principales cambios respecto a la edición de 1997 

La detección de Listeria monocytogenes se modifica de la siguiente manera:

• Enriquecimiento primario en medio semi-Fraser: incubación durante 25 h ± 1 h.
• Enriquecimiento secundario en medio Fraser: incubación durante 24h ± 2h.
• Los medios de enriquecimiento semi-Fraser y Fraser se pueden refrigerar antes de la transferencia o aislamiento en agar selectivo durante un máximo de 72 h.
• Almacenamiento de placas de aislamiento: las placas incubadas se pueden refrigerar durante un máximo de dos días antes de la lectura.
• El aspecto microscópico para la confirmación es opcional, si el agar de aislamiento permite distinguir entre Listeria spp. patógena y no patógena.
• La prueba CAMP y la prueba de catalasa son opcionales.
• Se incluyen nuevas características de rendimiento.
• La detección de Listeria spp. ha sido incluida en el alcance de la norma 

Debido a la gran variedad de alimentos y productos alimenticios existentes, este método horizontal puede no ser apropiado en todos los detalles para ciertos productos, para los que puede ser necesario utilizar métodos diferentes o específicos.

No obstante, este método horizontal se aplicará en la medida de lo posible y las desviaciones de éste solo se realizarán por razones técnicas justificadas.

Contenido de la norma

1 Objeto y campo de aplicación 
2 Normas para consulta
3 Términos y definiciones 
4 Principio
4.1 Generalidades 
4.2 Enriquecimiento primario en un medio líquido de enriquecimiento selectivo con concentración reducida de agentes selectivos (medio semi-Fraser)
4.3 Enriquecimiento secundario con un medio líquido de enriquecimiento selectivo con la concentración completa de agentes selectivos (medio Fraser)
4.4 Siembra en placa e identificación
4.5 Confirmación
5 Reactivos y medios de cultivo 
6 Equipamiento y material fungible
7 Toma de muestras 
8 Preparación de la muestra para análisis
9 Procedimiento
9.1 Porción para análisis y suspensión inicial
9.2 Enriquecimiento primario
9.3 Enriquecimiento secundario
9.4 Siembra en placa identificación
9.4.1 Generalidades
9.4.2 Agar de Listeria conforme a Ottaviani y Agosti
9.4.3 Segundo medio selectivo
9.5 Confirmación de Listeria monocytogenes o Listeria spp
9.5.1 Selección de colonias para su confirmación
9.5.2 Confirmación de L. monocytogenes
9.5.3 Confirmación de Listeria spp.
9.6  Interpretación de las propiedades morfológicas y fisiológicas y de las reacciones bioquímicas.
9.7 Caracterización adicional de las cepas aisladas (opcional) 
10 Expresión de los resultados
11 Características de funcionamiento del método
11.1 Estudios de validación del método 
11.2 Sensibilidad 
11.3 Especificidad 
11.4 Nivel de detección (LOD50)
12 Informe del análisis 
13 Garantía de la calidad
Anexo A (Normativo) Diagrama del procedimiento 
Anexo B (Normativo) Composición y preparación de los reactivos y medios de cultivo 
Anexo C (Informativo) Distinción de Listeria spp. frente a otros géneros 
Anexo D (Informativo) Reacciones de identificación de las especies de Listeria 
Anexo E (Informativo) Medios de agar selectivos para Listeria 
Anexo F (Informativo) Resultados de los estudios interlaboratorios para la detección de Listeria monocytogenes 
Bibliografía

Más información en la web de AENOR